Dang NS1 Proteininin Belirlenmesinde Thio-NAD Döngüsü ile Ultrasensitif ELISA'nın Olağanüstü Değerleri

1. Giriş

Dang humması, dang hummasının neden olduğu akut bulaşıcı bir hastalıktır. Dang virüsüenfekte bir Aedes türü (Ae. aegypti veya Ae. albopictus) sivrisineğinin ısırığı yoluyla, yüksek ateş, baş dönmesi, baş ağrısı, döküntü ve Şiddetliağrılar (göz, kas, eklem veya kemik ağrısı), vb. Bu hastalık tropikal ve subtropikal iklimlerde yaygın olarak görülür. Her yıl tahminen 100 ila 400 milyon insan enfekte oluyor ve bunların %80'inden fazlası genellikle hafif ve asemptomatiktir. Bununla birlikte, şiddetli Dang humması, uygun şekilde tedavi edilmezse ölüm riskini artırabilir. Bu nedenle, bu hastalığın erken teşhisi, zamanında tedavisi için önemlidir.

Dikkat çekici bir şekilde, yüksek oranda korunmuş bir glikoprotein olan yapısal olmayan protein 1 (NS1), esas olarak enfeksiyon sırasında salgılanır. Dang virüs, yoğun olarak ana patogenez faktörü olarak kabul edilir. Dang humması. Bu nedenle, NSI genellikle bu hastalığın erken tespiti için bir biyobelirteç olarak kullanılır.

Bu çalışmada, sandviç enzimine bağlı bir immünosorbent testi(ELISA (ELISA))ile birlikte Tiyo Nikotinamid Adenin Dinükleotidi (TİO-NAD/S-NAD) Bisiklet Yöntemi (bundan böyle ultra hassas ELISA olarak anılacaktır) NSI'yi tespit etmek için kullanılır, ardından tespit doğruluğunu doğrulamak için NAAT ile karşılaştırma yapılır.

2. Geleneksel algılama yöntemlerinin avantajları ve dezavantajları Dang humması 

Şu anda, tİşte dört ana tespit yöntemi için Dang humması.


Viral izolasyon ve tanımlama yüksek özgüllüğe sahiptir, ancak zaman alıcıdır ve en az 5 gün sürer. Hızlı antijen testi, diğer yöntemler arasında en hızlı ve en uygun maliyetli olanıdır, ancak duyarlılık ve özgüllük nispeten düşüktür. IgM ve IgG'ye dayalı serolojik test, enfeksiyon gün sayısı ile sınırlıdır. bu Antikor seviyesi tespit edilebilir bir seviyeye yükselene kadar test ertelenmelidir.

Klinikte, NAAT genellikle belirlemek için uygulanır. Dang hummasıyüksek hassasiyeti ve özgüllüğü ile kir ile. Bununla birlikte, bu yöntem pahalı, zahmetli ve eğitimli personel tarafından yürütülmesi gereken yanlış pozitifliğe eğilimlidir. Bu yöntemlerin dezavantajlarının üstesinden gelmek için yeni bir tespit yöntemi ultra hassas ELISA bu çalışmada uygulanmıştır.

3. Thio-NAD döngüsü ile ultra hassas ELISA'nın iş akışı

Bir çift antikor dirsandviç ELISA'daki NS1 proteinini ve alkalin fosfatazı yakalamak için kullanılır dirikincil antikor üzerinde etiketlenmiştir. Antikorların yanı sıra, bir androsteron türevi, 3α-hidroksisteroid dehidrojenaz, tiyo-NAD ve NADH artiyo-NAD enzim döngü sistemini oluşturmak için kullanılır. Tiyo-NAD döngü reaksiyonu sırasında, tio-NADH sürekli olarak üçgen bir sayı şeklinde birikir ve 405 nm'lik bir absorbansta doğrudan ölçülebilir.

4. Dang NS1 Proteininin tespitinde ultra hassas ELISA ve NAAT'ın karşılaştırılması

NAAT'ta 60 örnek dang pozitiftir ve 25 örnek dang negatiftir. Bu dang pozitif örneklerin NAAT döngü eşiği (BT) değeri 12.42 ile 31.41 arasında değişmektedir. Ultra hassas ELISA'da, 59 örnek NAAT sonuçlarına uygun olarak pozitifken, 25 örnek NAAT sonuçlarına tamamen karşılık gelen negatiftir.

NAAT ile karşılaştırıldığında, ultra duyarlı ELISA'nın duyarlılığı ve özgüllüğü sırasıyla %98.3 ve %100'dür (Tablo 2). NAAT ile doğrulanmış 60 dang pozitif hasta örneğinden, ultra duyarlı ELISA'da sadece 1 örnek negatiftir. NAAT verileri, örneğin BT değeri 21.59 olan bir tip 4 DENV enfeksiyonu vakası olduğunu gösterdi. Ultra hassas ELISA'nın sonuçları, 0.972 (%95 CI: 0.917) kappa değeri ile NAAT sonuçlarıyla neredeyse mükemmel bir uyum içindedir-1.0).

5. Sonuç

Ultra hassas ELISA yönteminin uygulanması kolaydır ve profesyonel stajyerlerin çalıştırılmasını gerektirmez. Algılama, küçük bir numune alındıktan hemen sonra başlatılabilir. Düşük gelirli ülkelerde Dang humması hastalığının erken teşhisi için özellikle uygundur.

Referans

Chen, Po-Kai ve ark. "Thio-NAD Döngüsü ile Ultrasensitive ELISA Kullanarak Dang NS1 Proteini için Gelişmiş Tespit Yöntemi." Virüsler, cilt 15,9, 1894. 8 Eylül 2023, doi:10.3390/v15091894

Ürün avantajları ve özellikleri BONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC (BONTAC) o muNe birkaç işletmeden biri ÇinThio-NAD üretebilenile "Bonzyme"Tam enzimatik yöntem(Çevre dostu;Zararlı solvent kalıntısı yok) ve benzersiz "Bonpure" yedi adımlı arıtma teknolojisi. BONTAC, Ar-Ge, üretim ve satışı aşağıdakilerle bütünleştirir: yüksek kaliteli ve istikrarlı ürün tedariki sağlamak için kendine ait fabrikalar ve bir dizi uluslararası sertifika.

Feragatname

BONTAC, bu web sitesinde yer alan bilgi ve materyallere doğrudan veya dolaylı olarak güvenmenizden kaynaklanan herhangi bir iddiadan sorumlu tutulamaz.