Dang humması NS1 Proteininin Belirlenmesinde Tiyo-NAD Döngüsü ile Ultra Duyarlı ELISA'nın Olağanüstü Avantajları

1. Giriş

Dang humması, aşağıdakilerin neden olduğu akut bulaşıcı bir hastalıktır:Dang virüsüenfekte bir Aedes türünün (Ae. aegypti veya Ae. albopictus) sivrisinek ısırması yoluyla,yüksek ateş, baş dönmesi, baş ağrısı, döküntü veŞiddetliağrılar (göz, kas, eklem veya kemik ağrısı) vb. Bu hastalık tropikal ve subtropikal iklimlerde yaygın olarak yaygındır. Her yıl tahminen 100 ila 400 milyon insan enfekte oluyor ve bunların %80'inden fazlası genellikle hafif ve asemptomatiktir. Bununla birlikte, şiddetli Dang humması, uygun şekilde tedavi edilmezse ölüm riskini artırabilir. Bu nedenle, bu hastalığın erken teşhisi, zamanında tedavisi için önemlidir.

Dikkat çekici bir şekilde, yüksek oranda korunmuş bir glikoprotein olan yapısal olmayan protein 1 (NS1), esas olarak enfeksiyon sırasında salgılanır.Dangvirüs, yoğun bir şekilde ana patogenez faktörü olarak kabul edilir.Dang humması. Bu nedenle, NSI genellikle bu hastalığın erken teşhisi için bir biyobelirteç olarak kullanılır.

Bu çalışmada, sandviç enzime bağlı bir immünosorbent testi(ELİSA)ile birlikteTİO NİKOTİNAMID ADEN DİNÜKLEOTİD (TİO-NAD/S-NAD)bisiklet yöntemi (bundan sonra ultra duyarlı ELISA olarak anılacaktır) NSI'yi tespit etmek için kullanılır, ardından tespit doğruluğunu doğrulamak için NAAT ile karşılaştırma yapılır.

2. Geleneksel tespit yöntemlerinin avantajları ve dezavantajlarıDang humması 

Şu anda, tİşte dört ana tespit yöntemiiçin Dang humması.


Viral izolasyon ve tanımlama yüksek özgüllüğe sahiptir ancak zaman alıcıdır ve en az 5 gün sürer. Hızlı antijen testi, diğer yöntemler arasında en hızlı ve en uygun maliyetli olanıdır, ancak duyarlılık ve özgüllük nispeten düşüktür. IgM ve IgG'ye dayalı serolojik test, enfeksiyon günlerinin sayısı ile sınırlıdır.buantikor seviyesi saptanabilir bir seviyeye yükselene kadar test ertelenmelidir.

Klinikte, NAAT genellikle belirlemek için uygulanır.Dang hummasıyüksek duyarlılığı ve özgüllüğü ile kirlenir. Ancak bu yöntem pahalı, zahmetli ve yanlış pozitifliğe eğilimlidir ve eğitimli personel tarafından yapılması gerekir.Bu yöntemlerin dezavantajlarının üstesinden gelmek için yeni bir tespit yöntemiultra duyarlı ELISA bu çalışmada uygulanmıştır.

3. Tiyo-NAD döngüsü ile ultra duyarlı ELISA'nın iş akışı

Bir çift antikordirsandviç ELISA'daki NS1 proteinini ve alkalin fosfatazı yakalamak için kullanılırdirikincil antikor üzerinde etiketlenmiştir. Antikorların yanı sıra bir androsteron türevi, 3α-hidroksisteroid dehidrojenaz, tiyo-NAD ve NADHartiyo-NAD enzim döngü sistemini oluşturmak için kullanılır. Tiyo-NAD döngü reaksiyonu sırasında, tiyo-NADH sürekli olarak üçgen sayı şeklinde birikir ve 405 nm'lik bir absorbansta doğrudan ölçülebilir.

4. Dang humması NS1 Proteininin tespitinde ultra duyarlı ELISA ve NAAT'ın karşılaştırılması

NAAT'ta 60 örnek dang humması pozitif, 25 örnek ise dang humması negatiftir. Dang humması pozitif örneklerin NAAT döngü eşiği (CT) değeri 12.42 ile 31.41 arasında değişiyordu.Ultra duyarlı ELISA'da, 59 örnek NAAT sonuçlarına uygun olarak pozitifken, 25 örnek NAAT sonuçlarına uygun olarak tamamen negatiftir.

NAAT ile karşılaştırıldığında, ultra duyarlı ELISA'nın duyarlılığı ve özgüllüğü sırasıyla %98,3 ve %100'dür (Tablo 2). NAAT ile doğrulanmış 60 dang humması pozitif hasta örneğinden yalnızca 1 örnek ultra duyarlı ELISA'da negatiftir. NAAT verileri, örneğin CT değeri 21,59 olan tip 4 DENV enfeksiyonu vakası olduğunu gösterdi. Ultra duyarlı ELISA'nın sonuçları, 0.972 (%95 GA: 0.917) kappa değeriyle NAAT sonuçlarıyla neredeyse mükemmel bir uyum içindedir-1.0).

5. Sonuç

Ultra duyarlı ELISA yönteminin uygulanması kolaydır ve çalıştırılması için profesyonel kursiyer gerektirmez. Tespit, küçük bir numune alındıktan hemen sonra başlatılabilir. Özellikle düşük gelirli ülkelerde Dang humması hastalığının erken teşhisi için uygundur.

Referans

Chen, Po-Kai ve ark. "Tiyo-NAD Döngüsü ile Ultra Duyarlı ELISA Kullanan Dang humması NS1 Proteini için Gelişmiş Tespit Yöntemi." Virüsler cilt 15,9 1894. 8 Eylül 2023, doi:10.3390/v15091894

Ürün avantajları ve özellikleriBONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC OBirkaç işletmeden biriÇinThio-NAD üretebilenile"Bonzyme"Tam enzimatik yöntem(Çevre dostu;zararlı solvent kalıntısı yok) ve benzersiz "Bonpure" yedi adımlı arıtma teknolojisi. BONTAC, Ar-Ge, üretim ve satışı entegre eder. yüksek kaliteli ve istikrarlı ürün tedariki sağlamak için kendine ait fabrikalar ve bir dizi uluslararası sertifika.

Feragatname

BONTAC, bu web sitesindeki bilgi ve materyallere güvenmenizden doğrudan veya dolaylı olarak kaynaklanan herhangi bir iddiadan sorumlu olmayacaktır.