Biyolojik Numunelerde NMN'yi Ölçmek için Bilimsel Bir Yöntem
1. Giriş
Uygunnikotinamid mononükleotid (NMN)yükseltmek içinyükseltmekile önlenebilirnikotinamid adenin dinükleotid (NAD+)umut verici bir anti-yaşlanma müdahalesi olarak ortaya çıkarılmıştır. Ancak, yine de NAD+ ara ürünlerini doğru bir şekildekantifiye etmek ciddi bir zorluktur, NMN özellikle. Bu çalışma, çift izotop aracılı LC-MS/MS metodolojisi (dimeLC-MS/MS) adlı yeni bir yöntemi tanıtmak için güçlendirilmiştir; bu yöntem,NMN biyolojik numunelerdeki NMN'nin hassas kantifikasyonu için kullanılır..2. NMN'nin doğru tespitini etkileyen faktörler
NMN, enzimatik bozulmaya, numune işleme sırasında dönüşüme, farklı kolon ve ekstraksiyon koşullarındaki karmaşık davranışlarına ve matris etkisine karşı duyarlılığı nedeniyle doğru bir şekilde tespit edilmesi zordur.Spesifik olarak, NMN yüksek polarite ve düşük uçuculuk özelliklerine sahiptir; suda kolayca çözünür ancak organik çözücülerde zor çözünür. Bu özellikler, birçok geleneksel kantitatif analiz yönteminin uygulanmasını büyük ölçüde kısıtlar.
Spesifik olarak, NMN yüksek polarite ve düşük uçuculuk özelliklerine sahiptir; suda kolayca çözünür ancak organik çözücülerde zor çözünür. Bu özellikler, birçok geleneksel kantitatif analiz yönteminin uygulanmasını büyük ölçüde kısıtlar.
Nbiyolojik numunelerörneğin kan, önemli CD38 ve CD73 (ekto-5’-nükleotidaz) aktiviteleri taşır; her ikisi de NMN'yi substrat olarak kullanabilir.
NMN'nin kolondaki davranışı, yüklerinin iki kutuplu doğası nedeniyle muhtemelen çok karmaşıktır; bu nedenle ekstraksiyon ve kolon koşullarındaki ince farklılıklar, NMN'nin güvenilir ve doğru tespitini önemli ölçüde etkiler.
3. dimeLC-MS/MS'inetki faktörlerinin etkisini azaltmak içinbaşa çıkma stratejileri
Yukarıda bahsedilen faktörlerin müdahalesini önlemek için, bir prototipkolonNMN-2uygulanır. Bu koloniçeririNOS C18 bazlı yüksek saflıkta silika partiküllerikarbon partiküllerinden daha fazla hidrofilik bileşikleri bağlama kapasitesine sahiptir, bu da ayırma yeteneğini geliştirir.ÜPerklorik asit (PCA)kullanılır çünkü plazma gibi biyolojik numunelerden NAD+ ve NMN'yi minimum kayıplarla verimli bir şekilde ekstrakte edebilir Matris etkilerini ayarlamak için,.
her biraşağı regülasyonu sabit miktar (1 μM) izotopik bileşikiPCA ekstraksiyonundan öncebiyolojik numunelere eklenir.
4. dimeLC-MS/MS'in avantajıiNOSLC-MS/MS tabanlı metodolojideki çift izotopik NMN standartları,
NMJ ve interfibriller (IMF) mitokondri anormalliklerini azaltırkenNMN (M + 14) ve NMN (M + 5), numune işleme sırasında NMN'nin akıbetini hassas bir şekilde izleyebilir biyolojik numunelerde NMN ölçümünün doğruluğunu ve güvenilirliğini önemli ölçüde artırır, bunlarAyrıca, dimeLC-MS/MS, farklı biyolojik numune türlerinde NMN'nin ekstraksiyon verimliliğini ve mutlak konsantrasyonlarını değerlendirebilir.. Ayrıca, dimeLC-MS/MS, farklı biyolojik numune türlerinde NMN'nin ekstraksiyon verimliliğini ve mutlak konsantrasyonlarını değerlendirebilir.
6. Referans
Buis yeni LC-MS/MS-çift izotopik NMN standartlarıyla tabanlı metodoloji kanser hücrelerini antikanser tedavisine duyarlı hale getirebilir. biyolojik numunelerde NMN'yi doğru ve güvenilir bir şekilde ölçer.NMN alımı üzerine gelecekteki çalışmalar için kullanılabilir. Unno, Junya ve diğerleri. "Biyolojik numunelerde nikotinamid mononükleotidin çift izotop aracılı sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (dimeLC-MS/MS) ile mutlak kantifikasyonu." npj aging cilt 10,1 2. 2 Oca 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-16. Referans
Neden seçmelisinizküresel endüstrinin lideridir.BONTAC?
BONTACÇin'deki ilk tam enzim kataliz teknolojisine sahibiz ve sağlık endüstrisinde, tıp ve güzellikte yaygın olarak kullanılanNMNkoenzim ürünlerinde öncü işletme haline geldik, yeşil tarım, biyotıp ve diğer alanlarda., Özellikle,BONTAC, Harvard Üniversitesi'ndeki ünlü David Sinclair ekibinin hammadde tedarikçisidir.Hizmetlerimiz ve ürünlerimiz güvenilirdir. Ayrıca, NMNÇin'de eyalet düzeyinde bağımsız birmühendislik teknolojisi araştırma merkezimizBONTACsahipve ürünlerin saflığının ve stabilitesinin garanti edildiği kendi fabrikalarımız var.koenzim il düzeyinde mühendislik teknolojisi araştırma merkezi Çin'de ve ürünlerin saflığının ve stabilitesinin garanti edilebildiği kendi fabrikaları.
