Biyolojik Örneklerde NMN'nin Nicelendirilmesi İçin Bilimsel Bir Yöntem
1. Giriş
Takviyenikotinamid mononukleotid (NMN)Yukarı düzenlemeseviye ofnikotinamid adenin dinukleotid (NAD+)umut vadeden bir yaşlanma karşıtı müdahale olarak açıklandı. Ancak yine de öyle Doğru olmak için ciddi bir meydan okumaNAD+ ara maddeleri nicelikle ölçer, NMN özellikle. Bu çalışma, kesin nicelendirilmesi için çift izotop aracılı LC-MS/MS metodolojisi (dimeLC-MS/MS) yöntemini tanıtmaya yetkilidir;NMN Biyolojik örneklerde.2. NMN'nin doğru tespitini etkileyen faktörler
NMN, enzimatiğe karşı savunmasızlığı nedeniyle doğru şekilde tespit edilmesi zordurbozulma, örnek işlemede dönüşüm, farklı sütun ve çıkarma koşullarında karmaşık davranışları ve matris etkisi.
Özellikle, NMN yüksek polarite ve düşük volatilite özelliklerine sahiptir; bu özellikler suda çözülmesi kolay ancak organik çözücülerde çözülmesi zordur. Bu özellikler, birçok geleneksel nicel analiz yönteminin uygulanmasını büyük ölçüde kısıtlar.
Bİolojik örneklerörneğin kan, CD38 ve CD73 (ecto-5) önemli aktiviteleri taşır’-nukleotidaz), her ikisi de NMN'yi substrat olarak kullanabilir.
NMN'nin sütundaki davranışı, muhtemelen yüklerinin iki parçalı olması nedeniyle çok karmaşıktır; bu nedenle çıkarma ve kolon koşullarındaki ince farklılıklar NMN'nin güvenilir ve doğru tespitini önemli ölçüde etkiler.
3. Başa çıkma stratejileridimeLC-MS/MS Çarpma Faktörlerinin Etkisini Azaltmak
Yukarıda bahsedilen faktörlerin müdahalesini önlemek için, a prototipSütunNMN-2 uygulanır. Bu köşe yazısıiçerirs C18 bazlı yüksek saflıkta silika parçacıkları bu bileşenler, karbon parçacıklarından daha fazla hidrofilik bileşikleri bağlama kapasitesine sahiptir ve ayrışma yeteneğini artırır.Perklorik asit (PCA) Çünkü bu işe yaralabilir NAD+ verimli bir şekilde çıkarmak ve minimum plazma gibi biyolojik örneklerden alınan NMN Kayıplar.
Matris etkilerini ayarlamak için,a her birinden sabit miktar (1 μM) İzotopik bileşikis eklendibiyolojik PCA ekstraksiyonundan önceki örnekler.
4. Avantajs dimeLC-MS/MS
DOuble izotopik NMN standartları, NMN (M + 14) ve NMN (M + 5), LC-MS/MS odaklı metodolojide örnek işleme sırasında NMN'nin kaderini kesin olarak izleyebilir, kibiyolojik örneklerde NMN ölçümünün doğruluğunu ve güvenilirliğini önemli ölçüde artırır. Ayrıca, dimeLC-MS/MS farklı biyolojik örnek türlerindeki ekstraksiyon verimliliğini ve mutlak NMN konsantrasyonlarını değerlendirebilir.
5. Sonuç
This yeni LC-MS/MS-çift izotopik NMN standartlarıyla yönlendirilmiş metodoloji can Accurately ve reliably biyolojik örneklerde NMN ölçüm. NMN alımıyla ilgili gelecekteki çalışmalar için kullanılabilir.6. Referans
Unno, Junya ve ark. "Biyolojik örneklerde nikotinamid mononükleotidin çift izotop aracılı sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (dimeLC-MS/MS) ile mutlak nicelendirilmesi." npj yaşlandırma cilt 10,1 2. 2 Ocak 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Neden seçersinBONTAC?
BONTACküresel liderdirNMNEndüstri. Çin'de ilk tam enzim kataliz teknolojisine sahibiz ve bu alanda önde gelen işletme olduk. Sağlık sektöründe, tıp ve güzellikte yaygın olarak kullanılan koenzim ürünleri, yeşil tarım, biyomedikal ve diğer alanlarda yer almaktadır. Özellikle,BONTAC NMNHarvard Üniversitesi'ndeki ünlü David Sinclair ekibinin ham madde tedarikçisi. Hizmetlerimiz ve ürünlerimiz güvenilirdir. Ayrıca,BONTACvarbağımsızKoenzim Mühendislik Teknolojisi Araştırma Merkezi İl düzeyinde Çin'de ve ürünlerin saflığı ve istikrarının sağlanabileceği kendi sahipliğindeki fabrikalar.
